技術知識
細胞破碎方法有哪些?
文章出處:原創(chuàng)
作者:洛尚中國(Lawson)
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發(fā)表時間:2016/12/11 13:29:11
液體剪切壓力:
通過將樣品從高壓腔轉入到低壓腔時產(chǎn)生的快速壓力落差來破碎細胞
優(yōu)點:破碎快速有效,適合大體積細胞破碎
缺點:可導致樣品溫度升高(操作時需要冷卻系統(tǒng))
超聲
通過高頻率的超聲波破碎細胞粉碎
優(yōu)點:操作簡單
缺點:可導致樣品溫度升高,其很難通過冷卻系統(tǒng)降溫,剪切力有可能導致蛋白質受損,噪音較大,破碎量較小
玻璃珠磨碎
用玻璃珠的攪動來磨碎細胞
優(yōu)點:對于很難破碎的細胞(如酵母)非常有用
缺點:有些慢且有噪音
滲透壓
從高滲透壓轉向低滲透壓介質
優(yōu)點:操作簡便,花費低廉
缺點:僅用于外壁較脆弱的細胞(如動物細胞)
反復凍融
通過反復形成冰晶破碎細胞;通常結合酶法裂解下細胞
優(yōu)點:操作簡便,花費低廉,產(chǎn)生大量細胞膜碎片
缺點:慢,也許會損傷敏感蛋白質或者破壞蛋白質和細胞膜的相互作用,產(chǎn)量低
酶法裂解
常和其他技術一同使用,如反復凍融或滲透壓破碎法;溶菌酶是破碎細菌細胞壁最常用的酶
優(yōu)點:溫和,可產(chǎn)生較大的細胞膜碎片
缺點:慢,產(chǎn)量低